Микробиологическое исследование крови и прокальцитонин в диагностике и мониторинге сепсиса

При экстренной госпитализации и в отделениях интенсивной терапии ежедневно возникает потребность в ранней диагностике сепсиса и его адекватной терапии. Сегодня существуют терапевтические стратегии, позволяющие уменьшить летальность пациентов с сепсисом, и поэтому быстрое и точное установление диагноза имеет решающее значение. Диагностика сепсиса часто бывает осложнена, так как при сепсисе отсутствует специфические клинические симптомы и признаки.

Среди новейший биомаркеров сепсиса прокальцитонин (ПКТ) обладает наиболее высокой диагностической точностью. При инфекционном поражении с системным действием уровень ПКТ быстро возрастает (в течении 6-12 часов). Так как лечение сепсиса можно решающим образом улучшить при раннем начале адекватной терапии, то измерение ПКТ рекомендуется для ранней диагностики у всех пациентов, у которых существует подозрение на сепсис и системную воспалительную реакцию.

Ежедневные изменения уровня ПКТ в плазме дают информацию о течении заболевания и позволяют прогнозировать исход сепсиса.

Бактериальный сепсис является одной из наиболее серьезных форм инфекционных заболеваний, поэтому быстрое обнаружение и идентификация патогенов гематогенного происхождения становится наиважнейшей задачей микробиологической лаборатории. Изменение взглядов на генез сепсиса самым непосредственным образом сказывается и на подходах к лечению больных.

Клиническая значимость регистрации бактериемии может заключаться в следующем: - подтверждении диагноза и определении этиологии инфекционного процесса, - доказательстве механизма развития сепсиса (напр. катетер-связанная инфекция) - для некоторых ситуаций аргументации тяжести течения патологического процесса (септический эндокардит, синегнойная и клебсиелезная инфекция) - обосновании выбора или смены режима антибиотикотерапии - оценке эффективности терапии.

Микробиологическая диагностика сепсиса является определяющей в выборе адекватных режимов антибактериальной терапии. Результаты этиотропной терапии сепсиса значительно лучше, нежели эмпирической. При соблюдении строгих требований к правильному забору материала и использовании современных методик частота выделения микроорганизмов из биосубстрата заметно повышается.

Выделение микроорганизма из крови (в норме стерильной жидкости) весьма важно для этиологического диагноза. При выделении типичных патогенов, таких как Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, грибы, диагностическую значимость имеет даже одна положительная гемокультура. Однако при выделении микроорганизмов, которые являются кожными сапрофитами и могут контаминировать пробу (Staphylococcus epidermidis, другие коагулазонегативные стафилококки, дифтероиды), для подтверждения истинной бактериемии требуется две положительные гемокультуры.

Для проведения адекватной микробиологической диагностики сепсиса следует строго соблюдать следующие правила.

1. Кровь для исследования необходимо забирать до назначения антибиотиков. В условиях невозможности отмены антибиотиков при сепсисе, взятие крови следует выполнять непосредственно перед очередным введением препарата. 2. Необходимым минимумом забора является две пробы, взятые из вен разных верхних конечностей с интервалом 30 минут. Оптимальным является забор трех проб крови, что существенно повышает возможность выявления возбудителя. Большее количество проб не имеет преимуществ перед трехкратным забором в плане частоты выявления бактериемии. Забор крови на высоте лихорадке не повышает чувствительности метода (категория доказательности С). 3. Кровь для исследования необходимо забирать только из периферической вены. Не показано преимуществ забора крови из артерии (категория доказательности С). 4. Оптимальным является использование стандартных коммерческих флаконов с готовыми питательными средами, а не флаконы с питательными средами, закрытые ватно-марлевыми флаконами, приготовленными в лаборатории. 5. Забор крови из периферической вены следует проводить с тщательным соблюдением асептики. Кожу в месте венепункции тщательно обрабатывают 70% этиловым спиртом, затем 1-2% настойкой йода концентрическими движениями от центра к периферии в течение минимум 1 мин. Дают высохнуть обработанному участку кожи. Во избежание раздражения кожи, участок венепункции следует обработать 70% этиловым спиртом для удаления избытка йода. При проведении венепункции используют стерильные перчатки. Крышку флакона со средой обрабатывают спиртом. Для каждой пробы забирают 10 мл крови. При использовании педиатрических флаконов оптимальное количество крови, которое необходимо внести - 1-4 мл.

Быстрое выделение гемокультуры у пациентов не только способствует этиологической диагностике и этиотропной терапии сепсиса, но имеет и прогностическое значение.

Диагностический центр медицинской академии оснащен полностью автоматизированной системой нового поколения BacT/ALERT 3D ("BIOMERIEUX", Франция), которая предназначена для быстрого обнаружения бактериемии и фунгемии в гемокультурах и других стерильных жидкостях организма, а также для обнаружения микобактерий.

Основные черты и преимущества прибора BacT/ALERT 3D:

- Для прибора BacT/ALERT 3D разработан широкий спектр сред для анаэробного и аэробного культивирования. Благодаря наличию добавки сорбента антибиотиков во флаконе, возможен анализ образцов, полученных от пациентов, с антибиотикотерапией. Также нет необходимости в использовании отдельных флаконов для грибов. Определение грибов проходит во флаконах для аэробов. Флаконы Pedi-BacT специально предназначены для использования в педиатрии и во всех случаях исследования малого объма образцов крови. Производство флаконов находится под строжайшим контролем. Каждый компонент - от внутреннего сенсора до колпачка - проверяется на соответствие требованием качества и стерильности.
- Точность и надежность результатов за счет использования высокучувствительной флуресцентной технологии. Присутствующие в образце микроорганизмы во время роста на питательной среде выделяют углекислый газ, который диффундирует через избирательно проницаемую мембрану и взаимодействует с сенсором. Изменение рН в ходе этого взаимодействия приводит к смене цвета сенсора с темно-зеленого на желтый. Малейшее изменение цвета улавливается высокочувствительными датчиками (измерение проводится каждые 10 минут), установленными в основании каждой ячейки с флаконами, преобразовывается в электрический сигнал, усиливается и передается в компьютер для анализа.
- Быстрое выявление положительных образцов. Бактериальный рост может быть обнаружен уже в первые 24 часа. Прибор может давать предварительную информацию по выявленным положительным культурам.