Диагностика инфекционных поражений центральной нервной системы методом полимеразной цепной реакции

Этиологическая верификация нейроинфекций является главным принципом клинической медицины, т.к. является непременным условием для выбора рациональной специфической терапии. Диагноз менингита или энцефалита имеет синдромальный характер и без понимания причин, вызвавших поражение центральной нервной системы (ЦНС) невозможно объективное обоснование этиотропного лечения, прогнозирование течения заболевания, а также проведение противоэпидемических мероприятий. Для определения этиологии нейроинфекций используются разнообразные лабораторные методы, основанные как на выявлении возбудителя, его антигенов или определении специфических антител. При этом так называемые «рутинные методы исследования» (культивирование возбудителя, определение динамики титра специфических антител и пр.) не обладают быстротой исполнения и высокой чувствительностью. Одним из методов, имеющим высочайшую чувствительность в сочетании со специфичностью и возможностью получения результата «в день проведения анализа», является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Методом ПЦР доступно определение нуклеиновых кислот (ДНК или РНК) любых биологических объектов. С точки зрения клинической значимости результата анализа, выявление ДНК/РНК равносильно выделению возбудителя.

Цель работы представить результы этиологической верификации острых поражений ЦНС при исследований ликвора методом ПЦР.

С октября 2002г. по октябрь 2004г. в отделе молекулярно-генетических исследований Диагностического Центра (ДЦ), являющегося научно-методической базой Днепропетровской медицинской академии, исследовано 50 образцов цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) методом ПЦР. В возрастном аспекте контингент обследованных состоял от новорожденных до лиц 80-летнего возраста. Реакция амплификации проводилась на термоциклире фирмы “Biometra” (ФРГ) с использованием коммерческих наборов «Амплисенс» (Москва, РФ). По направлению клиницистов ЦСЖ тестировалась на наличие ДНК: вируса простого герпеса 1+2 типов (ВПГ), цитомегаловируса (ЦМВ), вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ), токсоплазмы, микобактерий туберкулеза (МБТ). При этом только у 25% пациентов лечащие врачи назначили одновременное обследование ЦСЖ на три и более из указанных патогенов. Из всех проведенных анализов ликвора только у 8 (16%) была идентифицирована причина нейроинфекции. Этиологическая структура верифицированных возбудителей менингитов и/или энцефалитов по результатам работы ПЦР-отдела ДЦ представлена в таблице. Интересно отметить, что у всех 11 новорожденных детей с симптомами внутриутробного поражения ЦНС при исследованнии ЦСЖ методом ПЦР результаты анализа были негативны. Изучение диагностической значимости показало, что выделение нуклеиновой кислоты в ликворе методом ПЦР имеет высокую предсказывающую ценность (99,5%). Тогда как негативный результат исследования обладает более низкой предсказывающей диагностической ценностью (около 70 %) в отношении этиологии острого поражения ЦНС.

Таким образом, метод ПЦР является оптимальным способом экспресс-диагностики этиологии острых инфекций центральной нервной системы. Для повышения эффективности диагностики необходимо проводить тестирование на три и более патогена.

Литература:

Шостакович-Корецкая Л.Р, Маврутенков В.В., Маврутенков В.В., Братусь Е.В. Диагностика инфекционных поражений центральной нервной системы по результатам анализа ликвора методом полимеразной цепной реакции// Сб.трудов Генодиагностика инфекционных болезней.-Т.2.-М.Медицина для всех, 2004.-С.150-152