Метод иммуноферментного анализа (ИФА) основывается на двух
принципиальных научных открытиях. Первое заключается в способности
энзимов и антител, ковалентно или нековалентно связанных с
твердой основой, сохранять свою функциональную активность, т.е.
расщеплять субстрат (ферменты) и связывать антигены/антитела;
второе базируется на создании комплекса антитело-фермент (Аb-F) в
виде конъюгата, сохраняющего свою биологическую активность в
растворе. Аb-F-конъюгаты характеризуются высочайшей
специфичностью и чувствительностью, достигающей 97-99%.
Существует несколько модификаций ИФА: 1. ELISA (enzyme linked
immunoadsorbent assay) - метод определения с помощью
иммуносорбентов, связанных с ферментами; 2. EIA (enzyme
immunoassay) - метод на основе фермент-иммуноопределения; 3.
EMIT (enzyme multiplied immunoassay technique) - способ,
основанный на связи с ферментами. Первые две модификации (ELISA
и EIA) - это методы гетерогенного или твердофазного анализа
(тИФА), а третья разновидность (EMIT) является гомогенным ИФА.
Метод ИФА незамедлительно нашел свое самое широкое применение в
области иммуногистохимии, иммунологии, медицины и ветеринарии. В
настоящее время метод тИФА используется для определения широкого
класса веществ: гормонов, онкомаркеров, лекарственных препаратов в
крови больного (так называемый, мониторинг лекарственных
препаратов), наркотиков, бактерий, вирусов и антител против них.
Методами ИФА возможно определение иммуноглобулинов (видовая
принадлежность, субклассы, специфичность), а также идентификация
лимфоцитов (субпопуляций). В настоящее время практическому
здравоохранению стал доступен тИФА благодаря своей невысокой
стоимости и экологической безопасности, что привело к тому, что
данный метод лабораторного исследования перешёл в разряд
стандартных, «рутинных» анализов.
Казалось бы, врач получил в свои руки надежный и точный
инструмент для безошибочной диагностики и точной оценки
эффективности терапии, другими словами – возможность объективизации
лечебно-диагностического процесса. Однако, к сожалению,
тривиальность толкования (интерпретации) результатов лабораторных
исследований не всегда возможна.
Цель данного пособия представить опыт практического
использования и правильной интерпретации результатов, полученных
методом тИФА.
