В данном разделе будут рассмотрены только некоторые
виды патологии, при которых метод ПЦР является основой
диагностики и критерием эффективности лечения, а также имеются
доступные, стандартизованные, коммерческие тест-системы.
ВИЧ-инфекция
Этиологическим фактором ВИЧ-инфекции являются
вирусы HIV-1 и HIV-2 (от англ. Human Immunodeficiency Viruses)
из семейства Retroviridae.
Патогенез ВИЧ-инфекции заключен в инфицировании вирусом клеток с
фенотипом CD-4, присущий Т-лифоцитам хелперам и некоторым
другим клеткам организма человека. Прямое цитопатическое
воздействие, оказываемое вирусом иммунодефицита на указанные
клетки, в конечном итоге приводит к летальному исходу за счет
активации оппортунистических инфекций или развития опухолей.
Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции проводится в трёх
направлениях:
серологическая диагностика маркеров вируса методами
иммуноферментного анализа и иммуноблотинга, заключающаяся в
определении в сыворотки крови антигенов и антител против
ВИЧ.
определение вирусной НК (провирусной-ДНК или РНК) методом ПЦР,
как в крови, так и в клетках крови.
исследование иммунного статуса (количественная оценка CD-4
лимфоцитов), которая наиболее адекватно осуществляется методом
проточной цитофлюориметрии.
Особо необходимо отметить значение ПЦР в диагностике
ВИЧ-инфекции у детей первого года жизни. Ранняя диагностика
ВИЧ-инфекции у детей этого возраста в принципе невозможна без
применения ПЦР. Это обусловлено тем, что ребёнок, родившийся от
ВИЧ-инфицированной матери обязательно имеет антитела к вирусу
иммунодефицита. Различить материнские и собственные антитела к ВИЧ
не представляется возможным. У неинфицированного ребёнка данные
антитела элиминируются под влиянием собственной иммунной системой
к возрасту 6-9 месяцев, хотя в отдельных случаях могут
циркулировать до 18 месяцев жизни, но не более этого срока.
Необходимо отметить, что обследование методом ПЦР имеет смысл
только при полном отказе от грудного вскармливания ребёнка
ВИЧ-позитивной матерью с момента рождения, т.к. риск заражения
довольно высок и составляет около 5%.
Таким образом, ПЦР позволяет проводить дифференциальную
диагностику ВИЧ-статуса у детей раннего возраста. Так, если имеет
место положительный результат ПЦР на НК вируса иммунодефицита в
первые 48 часов жизни, то ВИЧ-инфицирование произошло in utero.
Если имеет место отрицательный результат ПЦР в первые 48 часов,
но становится положительным в возрасте 7 – 14 дней жизни, то
инфицирование произошло intrapartum.
В настоящее время ПЦР позволяет осуществлять не только
диагностику, но и мониторинг лечения ВИЧ-инфекции путем определения
концентрации РНК в плазме, а также выявления резистентных к
химиотерапии штаммов вирусаиммунодефицита. Определение “вирусной
нагрузки” в плазме крови является наилучшим прогностическим
критерием течения ВИЧ-инфекции и оценки эффективности
антиретровирусной терапии.
Таким образом, в настоящее время метод ПЦР является
основным лабораторным критерием диагностики, прогноза и оценки
эффективности лечения ВИЧ-инфекции.
